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造血干細胞無血清培養基P04-77450K適用于造血干細胞培養,即用型PowerStem HPSC。
造血干細胞無血清培養基P04-77450K儲存方法:2-8℃
應(ying)用:
應(ying)用(yong)于(yu)人(ren)來源(yuan)的T細胞培(pei)養擴(kuo)增(zeng),培(pei)養基需(xu)要(yao)添(tian)加刺激性(xing)抗體和細胞因子,另外每升培(pei)養基需(xu)要(yao)添(tian)加20ml 200mM的L。
操(cao)作(zuo):
平(ping)板培養(yang):
1. 按照已(yi)確定的方(fang)法(fa)來準備新(xin)鮮或者凍(dong)存的 PBMNCs (外周(zhou)血(xue)單個核細胞(bao))
2. 用血(xue)計(ji)(ji)數器計(ji)(ji)數細胞數量
3. 轉(zhuan)移適當數量的細胞到含有培(pei)養基(已加入細胞因子和刺激抗(kang)體)的培(pei)養瓶中
4. 把培養(yang)瓶(ping)放入培養(yang)箱(xiang)中, 37°C , 5% CO2 培養(yang).
產品(pin)特性:
Nobimpex 無血(xue)清(qing) T 細胞培(pei)(pei)養基 (Product number N103-1000) 已經經過嚴(yan)格(ge)的(de)測試可(ke)用于 PBMNC 中(zhong)的(de) T 細胞擴增。本(ben)產品已與其他幾種商業化(hua)可(ke)用的(de)無血(xue)清(qing)培(pei)(pei)養基做了 T 細胞擴增比(bi)較(jiao)。實驗中(zhong),200,000 PBMNCs/ml 在本(ben)產品和(he)另(ling)一商業化(hua)培(pei)(pei)養基中(zhong)培(pei)(pei)養 7 天,培(pei)(pei)養基含(han)有 100 IU/ml IL-2 和(he) anti-CD3 (OKT3, 20ng/ml) 抗體。.
實驗中擴增的(de)(de) T-細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)使用 51 鉻(ge)(ge)釋(shi)放(fang)分析來測試細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)溶(rong)解(jie)能(neng)力。靶細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao) (K562, 人(ren)慢性白血病細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)), 使用 51 鉻(ge)(ge)標(biao)記并連接到 anti-CD3 (OKT3) Fc 受體.。當與效應(ying)或(huo)(huo)者(zhe)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)毒 T 細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)混(hun)合時,,靶細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)就會(hui)凋亡或(huo)(huo)者(zhe)溶(rong)解(jie),并釋(shi)放(fang) 51 鉻(ge)(ge).。上清中 51 鉻(ge)(ge)的(de)(de)釋(shi)放(fang)量(liang)(liang)與靶細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)死亡及功(gong)能(neng) T 細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)數(shu)量(liang)(liang)成正比。